پروتئیناز K یک پروتئاز سرین چند منظوره است که در قارچ Parengyodontium یافت می‌شود. این آنزیم به خاطر توانایی‌اش در از بین بردن مو (کراتین) مشهور است. پروتئیناز K پیوندهای پپتیدی را در نزدیکی گروه کربوکسیل اسیدهای آمینه آلیفاتیک و آروماتیک با گروه‌های آلفا آمینه مسدود شده می‌شکند. با وزن مولکولی ۲۸۹۰۰ دالتون، پروتئیناز K عضوی از خانواده پپتیداز S8 است.

این آنزیم به طور موثر نوکلئازها را غیر فعال می‌کند که می‌توانند DNA یا RNA را در طول خالص‌سازی تجزیه کنند. همچنین، توانایی فعال ماندن در حضور عوامل دناتوره کننده مانند SDS و اوره و همینطور عوامل chelating مانند EDTA، معرف‌های سولفیدریل، و بازدارنده‌های تریپسین یا کیموتریپسین را دارد. پروتئیناز K برای تخریب پروتئین‌ها در لیزهای سلولی و آزادسازی اسیدنوکلئیک استفاده می‌شود، زیرا به طور موثر DNase ها و RNase ها را غیر فعال می‌کند.

پروتئیناز K توسط یون‌های کلسیم فعال می‌شود و به پایداری آن کمک می‌کنند. با این حال، زمان طولانی انکوباسیون و غلظت بالای پروتئاز منجر به هضم کامل پروتئین می‌شود. حذف یون‌های کلسیم پایداری آنزیم را کاهش می‌دهد، اما تاثیر قابل‌توجهی بر فعالیت proteolytic ندارد. هضم با پروتئیناز K معمولا در حضور EDTA برای مهار آنزیم‌های وابسته به یون فلزی مانند نوکلئازها انجام می‌شود.

این آنزیم در محدوده وسیعی از pH (‏۴ – ۱۲)‏ پایدار است ولی در pH=8 دارای فعالیت بهینه است. دمای بالای واکنش، افزودن SDS، گوانیدینیوم کلرید، گوانیدینیوم تیوسیانات و اوره، فعالیت پروتئیناز K را افزایش می‌دهند.

پروتئیناز K توسط ترکیباتی مانند Guanidinium chloride، Guanidinium thiocyanate، اوره، Sarkosyl، Triton X-100، Tween 20، SDS، سیترات، iodoacetic acid، EDTA، یا بازدارنده‌های سرین پروتئاز مانند TLCK و TPCK مهار نمی‌شود.

ویژگی‌های محصول:

1. هضم کارآمد پروتئین‌ها بدون تاثیر بر کیفیت نمونه
2. غیر فعال‌سازی موثر نوکلئازها در طول خالص‌سازی DNA و RNA
3. فعال ماندن در حضور عوامل دناتوره کننده مانند SDS و اوره
4. پایداری در محدوده وسیعی از pH
5. عدم مهار توسط ترکیبات مختلف مانند Guanidinium chloride و SDS

نقد بررسی کلی راجع به محصول:

پروتئیناز K یک ابزار بسیار کارآمد و همه کاره برای زیست شناسی مولکولی است. این آنزیم با توانایی هضم کارآمد پروتئین‌ها و حذف آلودگی‌ها در آماده‌سازی اسید نوکلئیک، به کاربران امکان می‌دهد تا استخراج و خالص‌سازی DNA و RNA را با دقت و کارایی بالا انجام دهند. فعال ماندن در حضور عوامل دناتوره کننده و پایداری در محدوده وسیعی از pH، از ویژگی‌های برجسته این محصول است. همچنین، عدم مهار توسط ترکیبات مختلف، پروتئیناز K را به یک انتخاب بسیار مطمئن برای استفاده در آزمایشگاه‌ها تبدیل کرده است.